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實驗動物生理生化指標(biāo)檢測(以小鼠為例)

來源:泰然健康網(wǎng) 時間:2024年12月25日 19:50

實驗動物臨床生理生化數(shù)據(jù)對于評估實驗動物的器官功能或損傷改變情況起著決定性或提示性作用。很少有出版物或文獻(xiàn)提供可靠的生理生化數(shù)據(jù)的正常參考值和分析方法。本文以實驗小鼠為例,介紹了血清、血漿和尿液的生化指標(biāo)數(shù)據(jù)檢測時取材要求和正常參考值等。

1. 實驗小鼠血清取材要求

采血后,立即將血液放入1.5 mL離心管(不需加抗凝劑或防腐劑)。讓血液在室溫下靜置30 - 60分鐘。在相對離心力(relative centrifugal force ,RCF)14000g下離心血樣10 - 15分鐘,用移液管吸取分離血清,并轉(zhuǎn)移到干凈的離心管中??蓪⒀鍢颖驹?4000 g下再離心2 - 3分鐘,以分離任何剩余的紅細(xì)胞。將分離好的血清轉(zhuǎn)移到干凈的離心管中。

2. 實驗小鼠血漿取材要求

血液必須在采血時或采血后立即與抗凝血劑充分混合。采血時與抗凝劑混合方法:用于血液收集的無菌1mL注射器可以將1 mL抗凝血劑從小瓶吸入注射器,然后將全部抗凝血劑重新注回小瓶,即在采血前用抗凝血劑“灌注”采血的注射器。采血后與抗凝劑混合方法:向1.5 mL離心管中加入不超過150μL的抗凝劑。在相對離心力14000g下離心血樣10 - 15分。用移液管吸取分離的血漿,并轉(zhuǎn)移到干凈的離心管中??蓪⒀獫{樣本在14000 g下再離心2 - 3分鐘,以分離任何剩余的紅細(xì)胞。將分離好的血漿轉(zhuǎn)移到干凈的離心管中。

3. 血清與血漿儲存要求

大多數(shù)生化分析最好的時間是收集后2小時內(nèi)在室溫下進(jìn)行分析。如果血清或血漿樣品不能在收集后2小時內(nèi)進(jìn)行處理,可將樣品(放在加蓋的試管中)放入4℃冰箱中短期儲存(1周)或放入20℃或更冷的冰箱中長期儲存(1周至6個月)。但有些指標(biāo)檢測例外,例如氨、乳酸鹽和血氣分析需要在采集后并在冰浴或4°C立即被分析。膽紅素在暴露于直射光時會降解,因此血液用于膽紅素分析應(yīng)該避光(可用鋁箔包裹離心管)。檢測乳酸脫氫酶建議室溫儲存。



4. 實驗小鼠血液/血漿臨床生化指標(biāo)正常參考值




5. 國內(nèi)利用全自動生化分析儀檢測血液樣本

全自動生化分析儀根據(jù)光電比色原理來測量血清或血漿中某種特定化學(xué)成分的儀器,可以用于大小鼠血液檢測,檢測肝腎功能、血糖、血脂、電解質(zhì)等。

檢測內(nèi)容:

A 大小鼠血常規(guī)檢測

B 五分類血球分析(帶網(wǎng)質(zhì)紅細(xì)胞)

C 血生化檢測

a 肝功能:(總蛋白(TP),白蛋白(ALB),總膽紅素(TBIL),谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST),堿性磷酸酶(ALP),膽堿酯酶(CHE),谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT),直接膽紅素(DBIL);

b 腎功能:肌酐(CRea),尿素(UREA),尿酸(UA) ,尿蛋白(UP);

c 血脂:甘油三脂(TG),膽固醇(T-CHO),低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C),高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C),游離脂肪酸(NEFA);

d 離子類:鈣(Ca),磷(P),鉀(K),鈉(Na),氯(CL),血清鐵(Fe);

e 心肌酶類:乳酸脫氫酶(LDH),肌酸激酶(CK)

f 糖尿病檢測項目:血糖GLU;

g 心血管風(fēng)險因子:同型半胱氨酸(HCY)

樣本要求:血生化送檢樣本量>100μl (本底為100μl,每個指標(biāo)需增加15μl);血常規(guī)送檢樣本量>150μl。

6. 實驗小鼠尿液收集方法及檢測指標(biāo)正常值

參考文獻(xiàn)及書籍

1. The Clinical Chemistry of LaboratoryAnimals, 3rd Edition .Edited By David M. Kurtz, Gregory S. Travlos. Edition FirstPublished 18 October 2017. eBook Published 18 October 2017. 1162 pages. eBookISBN 9781420091144.

2. Alemán CL, Más RM, Rodeiro I, Noa M,Hernández C, Menéndez R, Gámez R. Reference database of the main physiologicalparameters in Sprague-Dawley rats from 6 to 32 months. Lab Anim. 1998Oct;32(4):457-66.

3. Boehm O1, Zur B, Koch A, Tran N, FreyenhagenR, Hartmann M, Zacharowski K. Clinical chemistry reference database for Wistarrats and C57/BL6 mice. Biol Chem. 2007 May;388(5):547-54.

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