tRNA 的氨?；a(chǎn)生一種氨酰-tRNA (aa-tRNA)，它對(duì)核糖體上的蛋白質(zhì)合成有活性。tRNA 氨?；亩繉?duì)于理解特異性機(jī)制和 aa-tRNA 進(jìn)入蛋白質(zhì)合成機(jī)器的流量至關(guān)重要，這決定了細(xì)胞的生長(zhǎng)速度。用于量化 tRNA 氨酰化的傳統(tǒng)測(cè)定涉及放射性，無論是使用放射性氨基酸還是使用 [3'-32P] 標(biāo)記的 tRNA。我們?cè)诖嗣枋隽艘环N無標(biāo)記檢測(cè)，該檢測(cè)通過生物素化-鏈霉親和素 (SA) 與 aa-tRNA 上氨?；?α-胺或 α-亞胺結(jié)合來監(jiān)測(cè)氨?；?。偶聯(lián)的 aa-tRNA 產(chǎn)物很容易通過變性聚丙烯酰胺凝膠與未反應(yīng)的 tRNA 分離，從而可以對(duì)氨?；M(jìn)行定量測(cè)量。這種無標(biāo)記檢測(cè)適用于廣泛的氨基酸和 tRNA 序列以及兩類氨?；?。它比使用放射性氨基酸的檢測(cè)更靈敏、更穩(wěn)健，并且比使用 [3'-32P] 標(biāo)記的 tRNA 檢測(cè)有可能探索更廣泛的 tRNA。這種無標(biāo)記檢測(cè)報(bào)告的氨?；瘎?dòng)力學(xué)參數(shù)與使用放射性氨基酸報(bào)告的相似，表明其廣泛適用于與人類健康和疾病相關(guān)的研究。

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