瘦素是一種由脂肪細(xì)胞分泌產(chǎn)生的蛋白質(zhì)類激素，它通過(guò)抑制饑餓來(lái)幫助調(diào)節(jié)能量平衡，被稱為“饑餓激素”的胃饑餓素可拮抗瘦素發(fā)揮作用。瘦素分子量為16 kDa,是由146個(gè)氨基酸殘基組成的非糖基化蛋白，人瘦素與小鼠和大鼠的同源性分別為87%和84%，且人瘦素在小鼠和大鼠中可發(fā)揮生物學(xué)活性。瘦素主要產(chǎn)生于白色脂肪組織的脂肪細(xì)胞，也由褐色脂肪組織、胎盤(pán)、卵巢、骨骼肌、胃、乳腺上皮細(xì)胞、骨髓、胃主細(xì)胞和P/D1細(xì)胞產(chǎn)生。瘦素的表達(dá)情況受體內(nèi)激素、細(xì)胞因子及營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)影響,如參與正能量平衡的胰島素和糖皮質(zhì)激素可促進(jìn)瘦素表達(dá)，而參與負(fù)能量平衡的兒茶酚胺則抑制瘦素的表達(dá)。在肥胖人群中，瘦素的敏感性降低，導(dǎo)致在能量?jī)?chǔ)備高的情況下無(wú)法察覺(jué)飽腹感。

翌圣Human Leptin ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒，用于定量測(cè)定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清中的人瘦素(Human Leptin)。特異性抗人瘦素抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本，經(jīng)過(guò)孵育，樣本中存在的人瘦素與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測(cè)抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中人瘦素的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570 - 630 nm)測(cè)定吸光度值。

產(chǎn)品信息

貨號(hào)

97036ES48 / 97036ES96 

規(guī)格

48 T / 96 T

檢測(cè)范圍

15.63-1000 pg/mL

檢測(cè)方法

雙抗夾心法

檢測(cè)物種

人

檢測(cè)時(shí)長(zhǎng)

5小時(shí)

靈敏度

0.586 pg/mL

稀釋線性

81.9 - 96.1 %

回收率

73.9 - 106.9%

板內(nèi)差

2.9%

板間差

3.6%

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。

標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

人瘦素的最低檢測(cè)限為0.586 pg/mL，通過(guò)使用重復(fù)檢測(cè)20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。

酶標(biāo)板內(nèi)精密度

3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測(cè)定20次，評(píng)估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。

酶標(biāo)板間精密度

3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測(cè)30次，評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。

項(xiàng)目

板內(nèi)精密度

板間精密度

樣本

1

2

3

1

2

3

20

20

20

30

30

30

平均值

14.8

98.1

521.1

14.9

98.5

522.4

標(biāo)準(zhǔn)差

0.8

1.4

8.5

1.1

1.9

8.7

變異系數(shù)（%）

5.7

1.5

1.6

7.1

1.9

1.7

  通過(guò)不同水平的人瘦素添加于樣本中來(lái)測(cè)定回收率，其回收率如下:

樣本類型

平均回收率(%)

范圍（%）

血清

91.7

77.5-106.9

血漿

89.0

75.8-105.3

細(xì)胞培養(yǎng)上清

87.9

73.9-101.5

血清稀釋比例

平均期望值(%)

范圍（%）

1:02

91.1

89.6-92.3

1:04

86.9

85.6-88.6

1:08

86.9

85.8-88.1

1:16

91.7

90.7-93.7

血漿稀釋比例

平均期望值(%)

范圍（%）

1:02

91.2

90.6-92.1

1:04

86.2

82.7-88.2

1:08

84.3

82.2-85.5

1:16

91.7

90.7-93.4

細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例

平均期望值(%)

范圍（%）

1:02

89.2

86.8-93.8

1:04

85.4

83.1-88.5

1:08

86.7

81.9-92.3

1:16

94.6

93.2-96.1

應(yīng)用本試劑盒，檢測(cè)若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。

樣本類型

樣本數(shù)目

平均值（pg/mL）

樣本值（pg/mL）

血清

10

7560.0

645.8-19580.0

肝素血漿

10

9461.5

21.9-20524.6

EDTA血漿

10

11340.4

4056.9-32826.0

枸櫞酸鈉血漿

10

5240.5

1325.3-15307.8

細(xì)胞培養(yǎng)上清

10

n.d.

n.d.

n.d. 指樣本濃度值低于檢測(cè)范圍內(nèi)的15.63 pg/mL。

本試劑盒識(shí)別天然和重組人瘦素。下述因子進(jìn)行了特異性的評(píng)估，沒(méi)有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。

Recombinant human:

Recombinant mouse:

Recombinant rat:

IFN-γ

IL-17A

IFN-γ

IFN-γ

IL-1β

IL-18

IL-1β

IL-1β

IL-2

IL-21

IL-2

IL-4

IL-4

IL-22

IL-4

IL-6

IL-5

IL-23

IL-6

IL-10

IL-6

MCP-1

IL-10

TNF-α

IL-8

TGF-β1

IL-17A

IL-10

TNF-α

TNF-α

IL-12

VEGF

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網(wǎng)址: 人瘦素(Human Leptin) ELISA檢測(cè)試劑盒 Human Leptin ELISA Kit http://www.gysdgmq.cn/newsview827112.html